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（1）进入手术室必须更换洗手衣裤、鞋帽。（2）严格控制入室人数。（3）尽量减少层流手术室的开门次数与时间（更不可将门打开不关），维持'相对密闭状态'，以防外来污染的进入。（4）手术前用酒精擦拭室内物品、程仪器、设备等。（5）术后及时、彻底清洁室内所有物品、墙壁及地面。（6）妇女不可用粉、头发喷雾剂和指甲油之类的化妆品，以减少污染来源。
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工作服应选用不易产生静电、不易脱落纤维的涤纶和尼龙织物。定期检测层流系统功能状态，测试层流手术室环境空气洁净度指标和细菌培养等。总之，使用层流手术室，强化无菌观念和正规化管理仍然是程安全的根本保证与要求，仍然是手术室工作之根本、之重点，只有当两者紧密结合起来才是趋于的。
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手术室建筑要求:手术室应设在楼上，是一个单独的建筑较好，但应距离外1科病房、血库、病理科、急症室等有关单位较近的地方，并以走廊相连接，以便于工作。如果和其它科1室在一幢楼上，则可把楼房高层的某一端或某一层作为手术室，这样可以减少人员往来，便于管理和隔离，设有电梯或跑道式楼梯，以便接送病员。手术间分大(50平方米左右)、中(30平方米左右)两种，方向以朝北较好，这样可以避免直接光线照射。手术间的多少可根据手术科1室病床的多少而定。
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